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荧光原位杂交技术
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核酸原位杂交简称原位杂交。是以放射性或非放射性标记的 DNA 或 RNA 为探针,与组织、细胞及染色体上待检测的核酸按照碱基配对原则进行特异性结合形成杂交体。然后通 过组织化学或免疫组织化学方法显示核酸原位的杂交信号。由于非放射性标记探针具有安全、无放射性污染、稳定性好、显色快及易于观察等优点,近年来应用广泛。 荧光原位杂交技术(fluorescence in situ hybridization,FISH)属于非放射性原位杂交技术。其原理是将标记了生物素的单链DNA探针与中期或间期染色体进行原位杂交。通过间接免疫荧光法使信号放大,利用荧光显微镜观察荧光信号在染色体上的位置来反映靶基因的情况。 FISH技术将经典的细胞遗传学与分子生物学相结合,弥补了传统细胞遗传学方法对间期细胞、复杂核型细胞及染色体微缺失不能诊断的缺点,而且无需对骨髓、血液或实体瘤细胞进行培养,更加快速简便,被广泛应用于血液肿瘤的临床检测和研究,如白血病、淋巴瘤特异性易位的检测;骨髓增生异常综合征 与浆细胞骨髓瘤等血液肿瘤的诊断与预后分层等;微量残留病监测等。
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