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什么是FISH技术?荧光原位杂交技术是如何检测染色体结构变异的?
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http://www.youtube.com 荧光原位杂交技术 (Fluorescence in situ hybridization,FISH)是一种重要的非放射性原位杂交技术,出现于20世纪70年代末的遗传学实验技术。它根据 碱基互补配对原则 ,通过特殊手段使带有荧光物质的探针与目标DNA接合,最后用 荧光显微镜 即可直接观察目标DNA所在的位置 。 荧光原位杂交技术 的基本原理是如果被检测的染色体或DNA纤维切片上的靶DNA与所用的核酸探针是同源互补的,二者经变性—退火—复性,即可形成靶DNA与核酸探针的杂交体。将核酸探针的某一种核苷酸标记上报告分子如生物素、地高辛,可利用该报告分子与荧光素标记的特异亲和素之间的免疫化学反应,经荧光检测体系在镜下对待测DNA进行定性、定量或相对定位分析。 荧光原位杂交技术已经被应用于多个领域。 染色体研究 荧光原位杂交技术能够检测染色体结构变异,可以较容易地检测出缺失、附加或替换的染色体。将染色体或者部分具有特异性的染色体处理制作成为荧光探针,对细胞中期的染色体进行检测.可以发现染色体会呈现不同颜色的条带,进而可以确定基因在染色体上的准确位置,达到染色体描绘的目的.能够用于识别染色体重组、断裂点分布、鉴别染色体外核物质的起源等方面 。 基因定位 基因定位是荧光原位杂交的最基础最成功的应用。利用荧光原位杂交灵敏、准确,并且可以一次检测多段基因等特点,可以确定目标基因的准确位置,确定几个基因之间的位置关系,以及基因与染色体端粒之间的关系,基因与着丝点的关系,是构建基因图谱的基本要素。荧光原位杂交技术被广泛地应用于基因的物理定位及基因图谱的绘制。 肿瘤诊断 肿瘤已经成为现代人类死亡的主要原因之一,肿瘤的提前确诊对治疗有着极大的帮助。过去诊断细胞样本中是否含有肿瘤细胞主要用巴氏染色法等一些细胞化学染色法,一些辅助诊断手段出现相比过去的方法更快捷简单,荧光原位杂交技术就是其中之一。荧光原位杂交技术已经被应用到膀胱癌、胆道恶性肿瘤、Barrett食管及食管腺癌、宫颈癌等多种肿瘤的初期诊断中,并且效果显著 。 其余应用 另外,荧光原位杂交技术与其他技术的联用,如与免疫、量子点、微流控芯等技术联用,提高了效率,缩短了周期 。
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