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流式ROS检测
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活性氧簇ROS是由氧分子还原所形成的分子或者离子,大部分都是由线粒体产生的副产物,它们会在细胞代谢包括细胞内呼吸和底物氧化过程中产生。适量的ROS是细胞必需的,因为ROS参与维持细胞存活及生理功能所需的各种生活过程,如信号转导和基因表达,但过量或过少的ROS都会诱导氧化应激,破坏核酸、蛋白质、脂质、碳水化合物和细胞膜等,导致细胞死亡和组织破坏。 DCFH-DA本身没有荧光,可以自由穿过细胞膜,进入细胞后,被水解生成DCFH。而DCFH不能透过细胞膜。细胞内的ROS可以氧化无荧光的DCFH生成有荧光的DCF。DCF被488nm激发光激发后,发射530nm的荧光信号,被FITC通道接收,检测DCF的荧光就可以判定细胞内活性氧ROS的水平。 实验流程: 收集细胞-PBS洗涤细胞-细胞计数-装载探针-孵育探针-上机检测 送样运输要求: 需要活细胞(只接武汉本地样本,外地样本不接)。 细胞汇合度高于70%(6 孔板),多提供2 个空白孔,做阴性和阳性对照。 如果细胞带绿光,不能检测。
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