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3.36 化学合成的sgRNA与体外转录sgRNA的区别?
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化学合成的sgRNA与体外转录sgRNA的区别? 化学合成的sgRNA与体外转录(IVT)sgRNA在基因编辑应用中有着各自的特点和优势。 1.编辑效率:化学合成的sgRNA通常具有更高的编辑效率。这可能是因为化学合成的sgRNA可以进行特定的修饰,从而提高其稳定性和对目标DNA的亲和力。一些研究表明,在sgRNA两端添加硫代和甲氧基修饰可以显著提高基因编辑效率。 2.细胞毒性:体外转录的sgRNA由于带有5'三磷酸修饰,可能会激活细胞内的免疫反应,导致细胞毒性。这种免疫反应可能会干扰后续实验。相比之下,化学合成的sgRNA不含这种修饰,因此在减少细胞毒性方面更为有利。 3.稳定性:化学合成的sgRNA通过特殊修饰提高了其在储存和实验中的稳定性。这些化学修饰还能提高sgRNA的抗酶降解能力,从而在细胞内保持更长时间的活性。 4.操作便利性:化学合成的sgRNA通常是现成可用的,适合快速实验需求。而体外转录的sgRNA需要较为复杂的制备过程,包括设计、合成模板DNA、转录、纯化等步骤,这不仅耗时而且成本较高。 总的来说,化学合成的sgRNA在基因编辑中提供了更高的效率、更低的细胞毒性、更好的稳定性以及更简便的操作流程,这使得它在某些情况下比体外转录(IVT)sgRNA更受青睐。
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3.37 单链sgRNA相比于crRNA和tracrRNA双链体的优势
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3.34 CRISPR实验中如何选择递送体系?
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CRISPR-Cas9技术基础知识50问-第3问
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2.11 文献分享:新一代碱基编辑器,实现高效、大范围碱基编辑
CRISPR-Cas9技术基础知识50问-第5问
CRISPR-Cas9技术基础知识50问-第2问
CRISPR-Cas9技术基础知识50问-第4问
CRISPR-Cas9技术基础知识50问-第8问
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CRISPR-Cas9技术基础知识50问-第7问
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3.31 稳转细胞系的构建常用方法有哪些?有何区别?
CRISPR-Cas9技术基础知识50问-第6问
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1.37 为什么WB实验不完全适用于KO细胞的敲除效率评估(5)
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CRISPR-Cas9技术基础知识50问-第11问
CRISPR-Cas9技术基础知识50问-第9问
当动物界的超级英雄们相遇,会发生什么?
7.3 转染细胞的质粒为什么要去除内毒素?
2.13文献分享:基因编辑技术为治愈精氨酸琥珀酸尿患者带来曙光!
3.29 购买的细胞系STR鉴定报告怎么看?
大师姐优选:高质量基因敲除多克隆细胞池4周交付6666元!
2.6文献分享:甲酸溢出驱动MTHFD1抑制的癌细胞中有毒的叶酸捕获
1.1如何评估基因编辑的效果?
1.25 一旦确定某个基因需要基因编辑,我们如何选择敲除还是敲低
6.11 细胞转染之后的抗性筛选阶段细胞一直不死是什么原因?
巧用AAV,高分文章不发愁——赛业AAV助力高分文章
7.5 电穿孔转染质粒时,为什么会出现转染后细胞不贴壁或者死亡情况?