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7.6 相同转染条件下,为什么逆向脂质体转染后的细胞状态比正向脂质体转染的状态差很多?
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相同转染条件下,为什么逆向脂质体转染后的细胞状态比正向脂质体转染的状态差很多? 正向脂质体转染(Forward Transfection)和逆向脂质体转染(Reverse Transfection)是两种常用的脂质体介导的转染方法。两者的主要区别在于转染的时间点:正向转染是先将细胞种植在培养板中,然后再加入含有质粒和脂质体的混合物;逆向转染则是先将含有质粒和脂质体的混合物加入培养板中,然后再加入细胞。 由于逆向转染的特殊性,细胞在接触培养板的同时就接触到了脂质体和质粒,这可能会对细胞产生较大的压力。以下是一些可能的原因: 1.细胞应激反应:逆向转染时,细胞在接触到培养板的同时就接触到了脂质体和质粒,这种突然的压力可能会导致细胞产生应激反应,影响其生理状态。 2.细胞附着问题:逆向转染时,由于培养板上已经有了脂质体和质粒,这可能会影响细胞对培养板的附着。 3.转染效率问题:虽然理论上逆向转染可以提高转染效率,但是如果操作不当,可能会导致转染效率低下,从而影响细胞状态。 4.脂质体毒性:脂质体本身具有一定的毒性,如果转染时使用的脂质体浓度过高,可能会导致细胞死亡。 因此,在进行逆向转染时,需要特别注意操作步骤和条件,以减少对细胞的影响。
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